СИНТЕЗ РЕКОМБИНАНТНОГО СН2-СН3 УЧАСТКА Fс-ФРАГМЕНТА IgG1 ЧЕЛОВЕКА И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МЫШИНЫХ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ

В клетках E. coli синтезирован рекомбинантный белок rFс IgG, представляющий собой СН2 и СН3 домены Fc-фрагмента γ-цепи IgG1 человека. Белок rFс IgG является полидетерминантным антигеном, содержащим линейные эпитопы для антител к IgG человека. Проведена иммунизация мышей белком rFс IgG. Показано, что rFс IgG обладает высокой иммуногенностью для мышей и может быть использован для получения антивидовых поликлональных антител к IgG человека. Обнаружено, что мышиные поликлональные антитела к rFc IgG проявляют слабо выраженную перекрестную реактивность в отношении IgM человека, а кроме того, выявлена высокая вариабельность значений титров антител, полученных от разных животных. Для решения этих проблем предлагается проводить оценку качества материала, полученного в результате каждой иммунизации, и отбирать подходящие образцы антител с учетом их авидности, специфичности и титра. 

1. The production of polyclonal antibodies in laboratory animal. The report and recommendations of ECVAM workshop 35 / P.P. Leenaars [et al.] // ATLA. – 1999. – Vol. 27, N 1. – P. 79–102.

2. Кэтти, Д. Антитела. Методы : пер. с англ. / Д. Кэтти, Ч. Райкундалиа. – М. : Мир, 1991. – Т. 2. – 382 с.

3. Novotny, J. Location of antigenic epitopes on antibody molecules / J. Novotny, M. Handschumacher, E. Haber // J. Mol. Biol. – 1986. – N 4. – P. 715–721.

4. Hajighasemi, F. Production and characterization of mouse monoclonal antibodies recognizing human pan-IgG specific conformational or linear epitopes / F. Hajighasemi, J. Khoshnoodi, F. Shokri // Avicenna J. Med. Biotech. – 2012. – Vol. 4, N 4. – P. 170–177.

5. Characterization of epitopes of pan-IgG/anti-G3m(u) and anti-Fc monoclonal antibodies / P. Nelson [et al.] // Immunol. Lett. – 2003. – Vol. 88, N 1. – P. 77–83.

6. Characterization of anti-IgG monoclonal antibody A57H by epitope mapping / N. Nelson [et al.] // Biochem. Soc. Transact. – 1997. – Vol. 25, N 2. – P. 373.

7. Schroeder Jr., H.W. Immunoglobulins: structure and function / H.W. Schroeder Jr., D. Wald, N.S. Greenspan // Fundamental Immunology / ed. W.E. Paul. – 7rd ed. – Philadelphia : Wolters Kluwer Health ; Lippincott Williams & Wilkins, 2013, XVIII. – 1283 p.

8. Laemmli, U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmli // Nature. – 1970. – Vol. 227. – P. 680–685.