ОПТИМИЗАЦИЯ АЛГОРИТМА ГЕЙТИРОВАНИЯ БАЗОФИЛОВ НА ПРОТОЧНОМ ЦИТОМЕТРЕ: МНОГОЦВЕТНЫЙ АНАЛИЗ
Аннотация
Проанализировано 7 способов гейтирования базофилов с использованием многоцветного анализа на проточном цитометре. Показано, что наиболее эффективными и надежными способами гейтирования для проведения теста активации базофилов являются IgEhi и CD123+HLA-DR–. Проведены исследования стабильности экспрессии маркеров идентификации базофилов в зависимости от статуса активации базофилов. Установлено, что молекулы IgE и CD123, в отличие от молекул CD203c и CD193, не имеют значимых различий в интенсивности экспрессии при аллергенспецифической активации базофилов. Количество примеси других популяций в регионе базофилов при гейтировании с использованием маркеров IgEhi и CD123+HLA-DR– минимально, что указывает на то, что данные маркеры идентификации могут быть с успехом использованы для проведения теста активации базофилов.
Об авторах
И. В. Романова
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Беларусь
науч. сотрудник лаборатории иммунологии и клеточной биотехнологии. Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Беларусь
науч. сотрудник лаборатории иммунологии и клеточной биотехнологии. Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
А. Е. Гончаров
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Беларусь
канд. мед. наук, зав. лабораторией иммунологии и клеточной биотехнологии. Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Беларусь
канд. мед. наук, зав. лабораторией иммунологии и клеточной биотехнологии. Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Н. И. Дударева
10-я городская клиническая больница
Россия
канд. мед. наук, зав. отделением аллергологии и профпатологии
Россия
канд. мед. наук, зав. отделением аллергологии и профпатологии
Список литературы
1. Pros and cons of clinical basophil testing (BAT) / H. J. Hoffmann [et al.] // Curr. Allergy Asthma Rep. – 2016. – Vol. 16, N 8. – P. 56–68.
2. The clinical utility of basophil activation testing in diagnosis and monitoring of allergic disease / H. J. Hoffmann [et al.] // Allergy. – 2015. – Vol. 70 – P. 1393–1405.
3. Macglashan, D. Jr. / IgE and FcεRI regulation / D. Jr. Macglashan // Ann. N. Y. Acad. Sci. – 2005. – Vol. 1050. – P. 73–88.
4. Flowcytometric analysis of basophil counts in human blood and inaccuracy of hematology analyzers / S. Ducrest [et al.] // Allergy. – 2005. – Vol. 60. – P. 1446–1450.
5. Prostaglandin D2 selectively induces chemotaxis in T helper type 2 cells, eosinophils, and basophils via seven-transmembrane receptor CRTH2 / H. Hirai [et al.] // J. Exp. Med. – 2001. – Vol. 193, N 2. – P. 255–261.
6. Allergen-specific basophil suppression associated with clinical tolerance in patients with milk allergy / N. Wanich [et al.] // J. Allergy. Clin. Immunol. – 2009. – Vol. 123, N 4. – P. 789–794.
7. The monoclonal antibody 97A6 defines a novel surface antigen expressed on human basophils and their multipotent and unipotent progenitors / H. J. Bühring [et al.] // Blood. – 1999. – Vol. 94, N 7. – P. 2343–2356.
8. Sainte-Laudy, J. Analysis of membrane expression of the CD63 human basophil activation marker. Applications to allergologic diagnosis / J. Sainte-Laudy, C. Vallon, J. C. Guérin // Allerg. Immunol. (Paris). – 1994. – Vol. 26, N 6. – P. 211–214.
9. Diagnostic tests based on human basophils: more potentials and perspectives than pitfalls. II. technical issues / A. L. De Week [et al.] // J. Investig. Allergol. Clin. Immunol. – 2008. – Vol. 18, N 3. – P. 143–155.
10. WEASEL for flow cytometry [Electronic resource] // The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research. – Mode of access: http://www.frankbattye.com.au/Weasel/index.html. – Date of access: 19.06.2016.
11. BD FACSDiva™ Software [Electronic resource]. – Mode of access: http://www.bdbiosciences.com/instruments/software/facsdiva/index.jsp. – Date of access: 19.06.2016.
12. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica / О. Ю. Реброва. – М., 2008. – 312 с.
13. A guide to modern statistical analysis of immunological data [Electronic resource] / B. Genser [et al.] // BMC Immunol. – 2007. – Vol. 8, N 27. – Mode of access: http://www.biomedcentral.com/1471-2172/8/27. – Date of access: 19.06.2016.
14. CD203c-based basophil activation test in allergy diagnosis: Characteristics and differences to CD63 upregulation /E. M. Sturm [et al.] // Cytometry. Part B (Clin. Cytometry). – 2010. – Vol. 78B. – P. 308–318.
15. Recombinant allergens promote expression of CD203c on basophils in sensitized individuals / A. W Hauswirth [et al.] // J. Allergy Clin. Immunol. – 2002. – Vol. 110, N 1. – P. 102–109.
16. Macglashan, D. Jr. Expression of CD203c and CD63 in human basophils: relationship to differential regulation of piecemeal and anaphylactic degranulation processes individuals / D. Jr. Macglashan // Clin. Exp. Allergy. – 2010. – Vol. 40, N 9. – P. 1365–1377.
17. Bühring, H. J. The basophil-specific ectoenzyme E-NPP3 (CD203c) as a marker for cell activation and allergy diagnosis / H. J. Bühring, A. Streble, P. Valent // Int. Arch. Allergy Immunol. – 2004. – Vol. 133, N 4. – P. 317–329.
18. Selecting Reagents for Multicolor Flow Cytometry [Electronic resource] / H. Maecker, J. Trotter // BD Biosciences Application Note. – 2012. – Vol. 6. – Mode of access: web.mit.edu/flowcytometry/www/Becton%20Dickinson%20Multicolor_AppNote.pdf. – Date of access: 19.06.2016.
19. Comparison between antibodies from different providers: determination of median fluorescent intensities and stain indices [Electronic resource] / K. Reynvoet [et al.] // MACS&more. – 2012. – Vol. 14. – Mode of access: miltenyibiotec.com/~/media/Images/Products/Import/0010000/IM0010013.ashx. – Date of access: 19.06.2016.
20. The evolution of guidelines for the validation of flow cytometric methods / L. Du [et al.] // Int. Jnl. Lab. Hem. – 2015. – Vol. 37. – Suppl. 1. – Р. 3–10.
21. Chirumbolo, S. CCR3 as a Single Selection Marker Compared to CD123/HLADR to Isolate Basophils in Flow Cytometry: Some Comments / S. Chirumbolo, R. Ortolani, A. Vella // Cytometry A. – 2011. – Vol. 79, N 2. – Р. 102–106.
Рецензия
Для цитирования:
Романова И.В., Гончаров А.Е., Дударева Н.И. ОПТИМИЗАЦИЯ АЛГОРИТМА ГЕЙТИРОВАНИЯ БАЗОФИЛОВ НА ПРОТОЧНОМ ЦИТОМЕТРЕ: МНОГОЦВЕТНЫЙ АНАЛИЗ. Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия медицинских наук. 2016;(4):15-24.
For citation:
Ramanava I.U., Hancharou A.Y., Dudarava N.I. OPTIMIZATION OF BASOPHIL GATING ALGORITHM ON FLOW CYTOMETRY: MULTICOLOR ANALYSIS. Proceedings of the National Academy of Sciences of Belarus, Medical series. 2016;(4):15-24. (In Russ.)
Просмотров: 555
Послать статью по эл. почте 