vestimИзвестия Национальной академии наук Беларуси. Серия медицинских наукProceedings of the National Academy of Sciences of Belarus, Medical series1814-60232524-2350The Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"vestim-288Research ArticleКЛИНИЧЕСКАЯ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНАCLINICAL AND EXPERIMENTAL MEDICINEРОСТСТИМУЛИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТОВ ТРОМБОЦИТОВ В ОТНОШЕНИИ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК IN VITROGROWTH-STIMULATING ACTIVITY OF PLATELET PREPARATIONS IN RELATION TO MESENCHYMAL STEM CELLS IN VITROИгнатенкоС. И.IhnatsenkoS. I.noemail@neicon.ruКосмачеваС. М.KasmachovaS. M.4kosmacheva@mail.ruПотапнёвМ. П.PotapnevM. P.mpotapnev@yandex.ruКохноЕ. А.KahnoE. A.noemail@neicon.ruГончароваН. В.GoncharovaN. V.noemail@neicon.ruШахмутьЕ. А.ShahmutE. A.noemail@neicon.ruРеспубликанский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологийRepublican Scientific and Practical Center of Transfusion and Medical BiotechnologyБелорусский государственный медицинский университетBelarusian State Medical University201601012016015258Copyright © Игнатенко С.И., Космачева С.М., Потапнёв М.П., Кохно Е.А., Гончарова Н.В., Шахмуть Е.А., 20162016Игнатенко С.И., Космачева С.М., Потапнёв М.П., Кохно Е.А., Гончарова Н.В., Шахмуть Е.А.Ihnatsenko S.I., Kasmachova S.M., Potapnev M.P., Kahno E.A., Goncharova N.V., Shahmut E.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vestimed.belnauka.by/jour/article/view/288

Исследована способность растворимых факторов тромбоцитов человека – лизата (PL) и релизата (PR), полученных путем замораживания/размораживания и активации тромбоцитов тромбином соответственно, усиливать рост мезенхимальных стволовых клеток (МСК) человека in vitro. Установлено, что препараты PL и PR, полученные при исходной концентрации 5∙109 тромбоцитов/мл, одинаково увеличивали (в 5–7 раз) количество МСК к концу куль- тивирования in vitro в течение 7 сут в питательной среде, содержащей 10 % эмбриональной телячьей сыворотки или 5 % АВ(IV) сыворотки человека. При этом PL содержал в 3–9 раз больше эпидермального ростового фактора и основного фактора роста фибробластов, чем PR. Достоверных различий в содержании трансформирующего ростового фактора β1 в исследованных препаратах PL и PR не наблюдалось. Препараты PL и PR, полученные при концентрации 10∙109 тромбоцитов/мл, в 2–4 раза снижали уровень раннего и позднего спонтанного апоптоза МСК при их культивировании в течение 5 сут. Показано, что для наращивания МСК человека in vitro возможно использование как лизата, так и релизата тромбоцитов

The goal of the study was to evaluate the effects of platelet lysate (PL) and platelet releatase (PR) on human mesenchymal stem cell (MSC) proliferation and apoptosis in vitro. As shown, the content of epidermal growth factor, basic fibroblast growth factor, but not transforming growth factor-β1 was 3 to 9 times higher in PL when compared to PR. The MSC proliferation in vitro for 7 days was equally increased 5 to 7 times by PL and PR generated at a platelet concentration of 5∙109 per ml. The PL/PR-mediated favourable effect on the MSC proliferation was potentiated by the presence of 5 % human AB serum when compared to 10 % fetal calf serum in the vulture medium. Both PL and PR generated at a platelet concentration of 10∙109 per ml decreased 2 to 4 times the level of early and late apoptotic cells after MSC culturing for 5 days. Generally, we concluded that PL and PR preparations are equal to potentiate the MSC growth in vitro for biotechnological purposes.

ReferencesMazzucco, L. "Reasonable compromise" to define the quality standards of platelet concentrate for non-transfusion use (CPunT) / L. Mazzucco, V. Balbo, R. Guascino // Transfusion and Apheresis Sci. - 2012. - Vol. 47, N 2. - P. 207-211.Mazzucco, L. "Reasonable compromise" to define the quality standards of platelet concentrate for non-transfusion use (CPunT) / L. Mazzucco, V. Balbo, R. Guascino // Transfusion and Apheresis Sci. - 2012. - Vol. 47, N 2. - P. 207-211.Borzini, P. Tissue regeneration and in loco administration of platelet derivatives: clinical outcome, heterogeneous products, heterogeneous products, and heterogeneity of the effector mechanisms / P. Borzini, L. Mazzucco // Transfusion. -2005. - Vol. 45, N 11. - P. 1759-1767.Borzini, P. Tissue regeneration and in loco administration of platelet derivatives: clinical outcome, heterogeneous products, heterogeneous products, and heterogeneity of the effector mechanisms / P. Borzini, L. Mazzucco // Transfusion. -2005. - Vol. 45, N 11. - P. 1759-1767.Borzini, P. Platelet gels and releasates / P. Borzini, L. Mazzucco // Curr. Opinion in Hematol. - 2005. - N 12. - P. 473-479.Borzini, P. Platelet gels and releasates / P. Borzini, L. Mazzucco // Curr. Opinion in Hematol. - 2005. - N 12. - P. 473-479.Растворимые факторы тромбоцитов и регенеративная медицина / М. П. Потапнев [и др.] // Здравоохранение Беларуси. - 2014. - № 9. - С. 32-40.Растворимые факторы тромбоцитов и регенеративная медицина / М. П. Потапнев [и др.] // Здравоохранение Беларуси. - 2014. - № 9. - С. 32-40.Human AB serum and thrombin-activated platelet-rich plasma are suitable alternatives to fetal calf serum for the expansion of mesenchymal stem cells from adipose tissue / A. Kocaoemer [et al.] // Stem cells. - 2007. - N 25. - P. 1270-1278. -Doi:101634/stemcells.2006-0627.Human AB serum and thrombin-activated platelet-rich plasma are suitable alternatives to fetal calf serum for the expansion of mesenchymal stem cells from adipose tissue / A. Kocaoemer [et al.] // Stem cells. - 2007. - N 25. - P. 1270-1278. -Doi:101634/stemcells.2006-0627.Толстое, Д. А. Тромбоцитарные концентраты: классификация, технология получения, биологические эффекты / Д. А. Толстов, В. Г. Богдан // Воен. медицина. - 2012. - № 3. - С. 141-144.Толстое, Д. А. Тромбоцитарные концентраты: классификация, технология получения, биологические эффекты / Д. А. Толстов, В. Г. Богдан // Воен. медицина. - 2012. - № 3. - С. 141-144.Fekete, N. Platelet lysate from whole blood-derived pooled platelet concentrates and apheresis-derived platelet concentrates for the isolation and expansion of human bone marrow mesenchymal stromal cells: production process, content and identification of active components / N. Fekete, M. Gadelorge // Cytotherapy. - 2012. - N 14. - Р. 540-554.Fekete, N. Platelet lysate from whole blood-derived pooled platelet concentrates and apheresis-derived platelet concentrates for the isolation and expansion of human bone marrow mesenchymal stromal cells: production process, content and identification of active components / N. Fekete, M. Gadelorge // Cytotherapy. - 2012. - N 14. - Р. 540-554.Adipose tissue mesenchymal cell expansion in animal serum-free medium supplemented with autologous human platelet lysate / I. S. Blande [et al.] // Transfusion. - 2009. - N 49. - P. 2680-2685. - Doi: 10.1111/j.1537-2995.2009.02346x.Adipose tissue mesenchymal cell expansion in animal serum-free medium supplemented with autologous human platelet lysate / I. S. Blande [et al.] // Transfusion. - 2009. - N 49. - P. 2680-2685. - Doi: 10.1111/j.1537-2995.2009.02346x.Platelet-released supernatants increase migration and proliferation, and decrease osteogenic differentiation of bone-marrow-derived mesenchymal progenitor cells under in vitro conditions / R. Gruber [et al.] // Platelets. - 2004. - N 15. - P. 29-35.Platelet-released supernatants increase migration and proliferation, and decrease osteogenic differentiation of bone-marrow-derived mesenchymal progenitor cells under in vitro conditions / R. Gruber [et al.] // Platelets. - 2004. - N 15. - P. 29-35.Sanches-Guyo, F. M. Allogeneic mesenchymal stem cell therapy for refractory cytopenias after hematopoietic stem cell transplantation / F. M. Sanches-Guyo // Transfusion. - 2012. - Vol. 52, N 5. - P. 1086-1091.Sanches-Guyo, F. M. Allogeneic mesenchymal stem cell therapy for refractory cytopenias after hematopoietic stem cell transplantation / F. M. Sanches-Guyo // Transfusion. - 2012. - Vol. 52, N 5. - P. 1086-1091.Osteoblastic differentiation of human mesenchymal stem cells with platelet lysate / N. Chevallier [et al.] // Biomaterials. - 2010. - Vol. 31. - P. 270-278. - Doi: 10.1016/j.biomaterials.2009.09.043.Osteoblastic differentiation of human mesenchymal stem cells with platelet lysate / N. Chevallier [et al.] // Biomaterials. - 2010. - Vol. 31. - P. 270-278. - Doi: 10.1016/j.biomaterials.2009.09.043.Huang, Q. Preliminary separation of the growth factors in platelet-rich plasma: effects on the proliferation of human marrow-derived mesenchymal stem cells / Q. Huang // Chinese Med. J. - 2008. - Vol. 122, N 1. - P. 83-87.Huang, Q. Preliminary separation of the growth factors in platelet-rich plasma: effects on the proliferation of human marrow-derived mesenchymal stem cells / Q. Huang // Chinese Med. J. - 2008. - Vol. 122, N 1. - P. 83-87.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.